Dicas de laboratório inteligentes que todo especialista deve conhecer
Em um ambiente de laboratório movimentado, até mesmo pequenos ajustes podem fazer uma grande diferença. Não importa se você está otimizando fluxos de trabalho ou solucionando resultados inesperados, nossas dicas de laboratório apoiadas por especialistas estão aqui para ajudar.
Abaixo, reunimos insights essenciais sobre desafios comuns de laboratório – desde o manuseio de reagentes conjugados até a melhoria da precisão dos resultados – para que você possa manter seus ensaios funcionando sem problemas e com confiança.
Os clientes costumam entrar em contato conosco quando, de repente, encontram títulos altos. A grande questão é se os resultados são reais ou se foram causados por um erro técnico. Um possível motivo está descrito abaixo. Recomendamos que você use uma diluição em duas etapas para fazer uma diluição de amostra de soro de 1:500. A primeira etapa é adicionar 5ul de soro a uma placa de diluição, certificando-se de que você adicionou todas as amostras que precisam ser diluídas a essa placa. Se você tiver mais de uma placa de diluição, também pode pipetar todas as amostras nos poços, certificando-se de identificar as posições cuidadosamente com um modelo de placa BioChek. Em seguida, você adiciona 245ul de diluentes de amostras verdes para fazer a diluição inicial de 1:50.
A segunda etapa é adicionar 90 ml de diluente de amostra (diluente transparente ou verde, dependendo do tipo de kit) à placa de teste. Em seguida, adicione 10 µl de soro diluído da placa de diluição à placa de teste, fornecendo a diluição final necessária da amostra de 1:500. É de importância fundamental adicionar 90 ml de diluente à placa de teste antes de você adicionar 10 ml de soro diluído da placa de diluição à placa de teste.
Um erro comum é adicionar 10ul de soro diluído primeiro e, em seguida, 90ul de diluente de amostra. O resultado dessa ação é que, por um curto período, uma amostra com uma diluição de 1:50 estará reagindo com a placa revestida. Os títulos serão artificialmente elevados e os resultados causarão confusão.
Uma ajuda importante para confirmar que o procedimento de diluição foi realizado corretamente é usar nosso controle de referência liofilizado RS01. O valor desse controle é publicado no certificado de análise de cada kit.
Conclusão:
Seja muito rigoroso ao seguir os protocolos de teste, pois pequenas alterações podem causar grandes diferenças nos resultados.
Alguns clientes precisam executar placas parciais para um ou mais testes. O problema é que as placas de microtitulação revestidas com antígeno são sensíveis à exposição à umidade, o que pode ser um problema na execução de placas parciais. Portanto, todas as ações ao executar placas parciais são direcionadas para evitar que os poços não utilizados fiquem úmidos. Como é impossível evitar completamente a exposição à umidade, o prazo de validade da placa será prejudicado até certo ponto pela execução de placas parciais. Recomendamos que você use a placa inteira dentro de 2 a 6 semanas após ter usado a placa parcial pela primeira vez.
Outro componente que pode afetar o prazo de validade ao usar placas parciais é o conjugado. Isso ocorre porque o conjugado será equibrilado e exposto à temperatura ambiente com mais frequência do que quando você usa placas completas. A solução é medir a quantidade necessária de conjugado imediatamente ao retirar o kit da geladeira. Depois de medir a quantidade correta de conjugado, retorne o recipiente ao refrigerador para evitar que todo o conjugado atinja a temperatura ambiente.
Controles positivo e negativo
O kit contém volume suficiente de controle positivo e negativo para permitir um máximo de 15 execuções.
Tratamento da placa de microtitulação revestida:
A BioChek agora tem disponível um conjunto de kits de placas parciais que contém todas as instruções e materiais necessários (seladores de placas, bolsas de armazenamento seláveis, bolsas dessecantes) para a execução e o armazenamento de placas de teste parciais. O uso correto do conjunto de kits BC PP evita a deterioração das placas de antígeno revestidas, prolongando a vida útil das placas de teste parcialmente usadas de 2 a 6 semanas após o primeiro uso.
A BioChek implementa testes em anel para avaliar se os laboratórios de seus clientes estão produzindo resultados precisos. No ano passado, 23 laboratórios receberam amostras de níveis conhecidos de anticorpos. No entanto, eles não sabiam o resultado esperado. 17 desses laboratórios obtiveram bons resultados e os seis restantes, que não obtiveram, foram orientados pela BioChek sobre como melhorar sua precisão. Não é preciso dizer que eles produziram bons resultados após essa orientação.
Cada laboratório recebeu um conjunto de 12 soros liofilizados, oito dos quais eram idênticos para avaliar a repetibilidade.
Entre aqueles que não obtiveram bons resultados na primeira vez, o problema foi identificado pela BioChek para melhorar seus resultados.
Um laboratório obteve títulos altos em todas as amostras e a BioChek sugeriu que eles revisassem seu método de diluição. Três dos laboratórios estavam obtendo um CV alto, sugerindo inconsistências em suas técnicas. Por fim, três dos laboratórios mostraram que algumas amostras eram precisas e outras não. A BioChek sugeriu que eles testassem novamente seus equipamentos, para garantir que estivessem calibrados, ou usassem novas pipetas.
Todos os laboratórios, ao obterem bons resultados, receberam certificados para verificar sua conformidade.
O BioChek Software armazena os resultados e as informações do rebanho em um banco de dados on-line, permitindo que os usuários
Gerencie os resultados de ELISA e PCR com eficiência. Há uma variedade de relatórios disponíveis para gerenciar e
analisar dados como:
