Consejos de laboratorio inteligentes que todo especialista debería conocer
En un entorno de laboratorio ajetreado, incluso los pequeños ajustes pueden marcar una gran diferencia. Ya sea que esté optimizando los flujos de trabajo o solucionando resultados inesperados, nuestros consejos de laboratorio respaldados por expertos están aquí para ayudarle.
A continuación, hemos recopilado información esencial sobre los desafíos comunes del laboratorio, desde el manejo de reactivos conjugados hasta la mejora de la precisión de los resultados, para que pueda mantener sus ensayos funcionando de manera fluida y con confianza.
Los clientes a menudo se ponen en contacto con nosotros cuando de repente encuentran títulos altos. La gran pregunta es si los resultados son reales o si han sido causados por un error técnico. A continuación, se describe una posible razón. Recomendamos utilizar una dilución en 2 pasos para realizar una dilución de muestra de suero 1:500. El primer paso es añadir 5 ul de suero a una placa de dilución, asegurándose de añadir todas las muestras que necesiten dilución a esta placa. Si tiene más de una placa de diluciones, también puede pipetear todas las muestras en los pocillos, asegurándose de identificar cuidadosamente las posiciones con una plantilla de placa BioChek. A continuación, añada 245 ul de diluyente de muestra verde para realizar la dilución inicial de 1:50.
El segundo paso es añadir 90 ul de diluyente de muestra (diluyente transparente o verde, dependiendo del tipo de kit) a la placa de prueba. A continuación, añada 10 ul de suero diluido de la placa de dilución a la placa de prueba, proporcionando la dilución de muestra final requerida de 1:500. Es de vital importancia añadir los 90 ul de diluyente a la placa de prueba antes de añadir los 10 ul de suero diluido de la placa de dilución a la placa de prueba.
Un error común es añadir primero los 10 ul de suero diluido y luego 90 ul de diluyente de muestra. El resultado de esta acción es que, durante un breve período, una muestra con una dilución 1:50 reaccionará con la placa recubierta. Los títulos se elevarán artificialmente y los resultados causarán confusión.
Una ayuda importante para confirmar que el procedimiento de dilución se realizó correctamente es utilizar nuestro control de referencia liofilizado RS01. El valor de este control se publica en el certificado de análisis de cada kit.
Conclusión:
Sea muy estricto al seguir los protocolos de prueba, los cambios menores pueden causar grandes diferencias en los resultados.
Algunos clientes necesitan ejecutar placas parciales para 1 o más pruebas. El problema es que las placas de microtitulación recubiertas con antígeno son sensibles a la exposición a la humedad, lo que podría plantear un problema al ejecutar placas parciales. Por lo tanto, todas las acciones al ejecutar placas parciales están dirigidas a evitar que los pocillos no utilizados se humedezcan. Como es imposible evitar por completo la exposición a la humedad, la vida útil de la placa se verá afectada en cierto grado al ejecutar placas parciales. Recomendamos utilizar toda la placa en un plazo de 2 a 6 semanas después de haber utilizado la placa parcial por primera vez.
Otro componente que puede afectar a la vida útil al ejecutar placas parciales es el conjugado. Esto se debe a que el conjugado se equilibrará y se expondrá a temperatura ambiente con más frecuencia que cuando se utilizan placas completas. La solución es medir la cantidad necesaria de conjugado inmediatamente al sacar el kit del refrigerador. Después de medir la cantidad correcta de conjugado, vuelva a guardar el recipiente en el refrigerador para evitar que todo el conjugado alcance la temperatura ambiente.
Controles positivos y negativos
El kit contiene un volumen suficiente de control positivo y negativo para permitir un máximo de 15 ejecuciones.
Tratamiento de la placa de microtitulación recubierta:
BioChek ahora tiene un juego de kit de placa parcial disponible que contiene todas las instrucciones y materiales necesarios (selladores de placa, bolsas de almacenamiento sellables, bolsas de desecante) para ejecutar y almacenar placas de prueba parciales. El uso correcto del juego de kit BC PP evita el deterioro de las placas de antígeno recubiertas, extendiendo la vida útil de las placas de prueba parcialmente utilizadas de 2 a 6 semanas después del primer uso.
BioChek implementa ensayos interlaboratorios para evaluar si los laboratorios de sus clientes están produciendo resultados precisos. El año pasado, se enviaron muestras de niveles conocidos de anticuerpos a 23 laboratorios. Sin embargo, no conocían el resultado esperado. 17 de estos laboratorios lograron buenos resultados y los seis restantes que no lo hicieron fueron asesorados por BioChek sobre cómo mejorar su precisión. No hace falta decir que produjeron buenos resultados tras dicho consejo.
Cada laboratorio recibió un conjunto de 12 sueros liofilizados, ocho de los cuales eran idénticos para evaluar la repetibilidad.
De aquellos que no lograron buenos resultados la primera vez, BioChek identificó el problema para mejorar sus resultados.
Un laboratorio obtuvo títulos altos en todas las muestras y BioChek sugirió que revisaran su método de dilución. Tres de los laboratorios estaban logrando un CV alto, lo que sugiere inconsistencias en sus técnicas. Por último, tres de los laboratorios mostraron que algunas muestras eran precisas y otras no. BioChek sugirió que volvieran a probar su equipo, para asegurarse de que estaba calibrado, o que utilizaran pipetas nuevas.
Todos los laboratorios, tras la obtención de buenos resultados, recibieron certificados para verificar su conformidad.
El software BioChek almacena los resultados y la información del rebaño en una base de datos en línea, lo que permite a los usuarios
gestionar los resultados de ELISA y PCR de forma eficaz. Existe una variedad de informes disponibles para gestionar y
analizar datos como:
